BiFC 蛋白相互作用（Bimolecular Fluorescence Complementation, BiFC）是一种基于荧光蛋白复性的技术，用于研究蛋白-蛋白相互作用。该技术利用荧光蛋白（如黄色荧光蛋白 YFP、绿色荧光蛋白 GFP 或红色荧光蛋白 mCherry）的片段化特性，将其分裂为两个非荧光片段，分别与待研究的两个蛋白融合表达。当这两个蛋白在细胞内相互作用时，荧光蛋白片段靠近并复性，形成完整的荧光蛋白，恢复荧光信号，从而实现对蛋白互作的可视化检测。BiFC 蛋白相互作用分析在活细胞环境下进行，不依赖外源性化学物质，因此成为研究细胞信号传导、蛋白复合物形成及动态互作的工具，在癌症生物学、神经科学、植物生物学等领域均有广泛应用。BiFC 蛋白相互作用的主要优势在于其高灵敏度和直观可视化能力。相比传统的蛋白互作检测方法，如酵母双杂交（Y2H）、免疫共沉淀（Co-IP）和荧光共振能量转移（FRET），BiFC 无需外加荧光探针或激发/受体分子，直接通过荧光复性检测蛋白互作，从而降低了背景噪声，提高了检测灵敏度。此外，由于荧光复性后信号较稳定，BiFC 还可以用于检测短暂或低亲和力的蛋白相互作用，这在研究信号转导、应激反应及其他动态生物过程时具有价值。例如，在细胞周期调控研究中，BiFC 可用于揭示 CDK-Cyclin 复合物的形成；在神经科学研究中，BiFC 被用于检测突触蛋白间的相互作用，从而解析神经信号传递的关键机制。

BiFC 蛋白相互作用分析还具备出色的空间分辨率，可在亚细胞水平解析蛋白相互作用的定位。例如，通过靶向不同细胞器（如线粒体、内质网、高尔基体、细胞核等）的 BiFC 蛋白标记，可以研究特定细胞结构中的蛋白互作。此外，BiFC 还可与共聚焦显微镜、活细胞成像技术结合，实现对蛋白互作的动态监测，揭示蛋白复合物的时空变化。例如，在自噬研究中，BiFC 可用于实时观察自噬体形成过程中关键蛋白 ATG 之间的相互作用，为解析自噬机制提供有力证据。

尽管 BiFC 蛋白相互作用技术具有诸多优点，但其也存在一定局限性。例如，荧光蛋白复性通常是不可逆的，这意味着 BiFC 不能用于实时监测蛋白解离过程。此外，荧光蛋白片段复性可能影响目标蛋白的功能或稳定性，导致假阳性或假阴性结果。因此，在实验设计时，研究人员通常会使用点突变或阴性对照实验，以验证 BiFC 信号的特异性。此外，不同荧光蛋白的 BiFC 片段在复性效率、稳定性和荧光强度上可能存在差异，需根据实验需求选择合适的荧光蛋白系统。

近年来，BiFC 蛋白相互作用技术不断优化，以提高其实验精度和适用性。例如，双颜色 BiFC（Dual-color BiFC, dcBiFC）和三颜色 BiFC（TriFC）技术允许研究人员同时检测多对蛋白互作，为复杂的蛋白互作网络解析提供了更丰富的信息。此外，结合 CRISPR-Cas9 基因编辑技术，BiFC 使得内源性蛋白的互作研究成为可能，提高了实验的生理相关性。这些技术进步推动了 BiFC 在蛋白质互作网络、疾病机制研究及新药筛选等领域的应用。

百泰派克生物科技依托专业的蛋白质组学研究平台，为客户提供高质量的蛋白相互作用检测服务。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

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